貨源介紹

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　　F98大鼠膠質瘤細胞

　　平台編號:zl-077353

　　產品規格:1×10⁶cells/T25培養瓶

　　生長特性：貼壁生長

　　培養體係：DMEM（高糖）+10%FBS

　　傳代方法：1：2傳代

　　細胞形態：上皮細胞樣

　　凍存條件：無血清細胞凍存液

　　傳代方法：消化3-5分鍾。1:2傳代，3天內可長滿。

　　培養體係

　　溫度：37℃，氣相：95%空氣，5%CO2

　　細胞描述

　　本庫的細胞僅用於科研工作，未經許可不得用於其他目的，使用者不得將本庫細胞轉讓給第三者。

　　凍存條件：無血清細胞凍存液

　　細胞收到後處理：

　　細胞在培養瓶中培養至良好狀態後灌滿完全培養液並封好瓶口是細胞運輸的最好辦法。收到細胞回到自己的實驗室後，先打開外包裝，用75%酒精噴灑整個瓶消毒後放到超淨台內，嚴格無菌操作，培養箱靜置2-4小時。鏡下觀察：未超過80%匯合度時，可將瓶裝的完全培養液收集至離心管中，加入6ml完全培養基，放入37℃、5%CO2孵箱培養；超過80%匯合度時，根據情況傳代或者凍存，具體操作見細胞培養步驟。（注意發貨的是密封培養瓶的話，放入培養箱培養記得培養瓶蓋子擰鬆，傳代後建議一瓶用原瓶裏麵的完全培養基，另外一瓶用自己配的完全培養基）

　　細胞培養步驟：

　　1）複蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鍾，棄去上清液，補加4-6mL完全培養基後吹勻。然後將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入6cm皿中），培養過夜。第二天換液並檢查細胞密度。

　　2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。

　　1、對於貼壁細胞，傳代可參考以下方法：

　　1.棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

　　2.加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA）於培養瓶中，置於37℃培養箱中消化1-2min，然後在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓並脫落，迅速拿回操作台，輕敲幾下培養瓶後加5ml以上含10%血清的完全培養基終止消化。

　　3.輕輕吹打細胞，完全脫落後吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鍾，棄去上清液，補加1-2mL培養液後吹勻。

　　4.按5-6ml/瓶補加培養液，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含5-6ml培養液的新皿中或者瓶中。

　　2、對於懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

　　方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心8-10分鍾，棄上清液，補加1-2ml培養液後吹勻，將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或瓶中。

　　方法二：可選擇半數換液方式，棄半數培養基後，將剩餘細胞懸起，將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基新皿中或者瓶中。

　　細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。棄培養基後加入少量胰酶，細胞變圓脫落後，進行離心收集，1000RPM條件下離心8-10分鍾，去除上清，按凍存數量加入到凍存液中。

　　PS：若客戶收到2ml小管細胞，收到細胞後，用75%酒精噴灑整個管子消毒後放到超淨台或安全櫃內，嚴格無菌操作；將小管細胞轉移至T25培養瓶或6cm培養皿，加入5ml左右完全培養基混勻，放入培養箱過夜培養後查看細胞密度：若密度未超過80%，換液繼續培養，視情況傳代或者凍存。若密度超過80%，可直接進行傳代（方法同上）。

　　注意事項:僅用於科學研究或者工業應用等非醫療目的不可用於人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用（產品信息以出庫為準）