貨源介紹

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　　細胞名稱:AML-193（人急性單核細胞白血病單核細胞）

　　種屬:人

　　年齡（性別）女；13歲

　　組織來源器官：外周血；疾病：急性單核細胞白血病；細胞類型：單核細胞

　　生長特性:懸浮

　　細胞形態:淋巴母細胞樣

　　背景描述:白細胞介素3(IL-3)和粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)可協同刺激AML-193細胞生長。粒細胞集落刺激因子(G-CSF)也能支持AML-193細胞短期和長期生長，並與GM-CSF一起誘導細胞增殖；這株細胞正式命名為HTB-188。

　　生長培養基:IMDM＋5μg/ml Insulin＋5μg/ml Transferrin＋5ng/ml GM-CSF＋5%FBS＋1%P/S

　　培養條件氣相：空氣，95%；CO2，5%溫度：37℃

　　細胞處理：

　　1）凍存細胞的複蘇：

　　將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL完全培養基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，完全培養基重懸細胞。然後將細胞懸液加入含6-8ml完全培養基的培養瓶（或皿）中37℃培養過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。

　　2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。

　　對於貼壁細胞傳代可以參考以下方法：

　　1.棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

　　2.加入0.25％（w/v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA於培養瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置於37℃培養箱中消化1-2分鍾（難消化的細胞可以適當延長消化時間），然後在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓並脫落，迅速拿回操作台，輕敲幾下培養瓶後加入3-4ml含10%FBS的培養基來終止消化。

　　3.輕輕打勻後吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補加1-2mL培養液後吹勻。將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養基以保持細胞的生長活力，後續傳代根據實際情況按1:2~1:5的比例進行。

　　3）細胞凍存:收到細胞後建議在培養前3代時凍存一批細胞種子以備後續實驗使用。

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