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細胞介紹
HS 683細胞源自76歲白人男性的左顳葉側(ce) 膠質瘤組織。HS 683細胞有微絨毛,無橋粒。HS 683細胞可以用於(yu) 3D細胞培養(yang) 、癌症研究、神經科學研究。
基本信息
細胞別稱:Hs 683;HS-683;Hs-683;Hs683;
HS683;Hs 683.T;HS 683T;Hs683T
細胞來源:腦;左顳葉
細胞形態:成纖維細胞樣
生長特性:貼壁生長
安全等級:BSL1
包裝規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
推薦換液:2~3次/周
傳(chuan) 代比例:1:2-1:4
倍增時間:~49-96 hours
保藏機構:ATCC;HTB-138
培養(yang) 保存
培養(yang) 體(ti) 係:DMEM(TM055)+10%FBS(TS500)
培養(yang) 條件:氣相:空氣,95%;CO2.5%;溫度:37℃
凍存條件:基礎培養(yang) 基+5%DMSO+40%FBS(TS500),液氮保存
傳(chuan) 代步驟
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳(chuan) 代培養(yang) 。
棄去培養(yang) 上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次;
加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)於(yu) 培養(yang) 瓶中,置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中消化1-2分鍾,然後在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓並脫落,迅速拿回操作台,輕敲幾下培養(yang) 瓶後加少量培養(yang) 基終止消化;
按6-8ml/瓶補加培養(yang) 基,輕輕打勻後吸出,在1000RPM條件下離心4分鍾,棄去上清液,補加1-2mL培養(yang) 液後吹勻;
收到細胞後首次傳(chuan) 代推薦將細胞懸液按1:2的比例分到新的含6ml培養(yang) 基的新皿中或者瓶中,建議凍存一支備用,後續傳(chuan) 代根據實際情況按1:2到1:4的比例進行。
凍存步驟
細胞凍存時,棄去培養(yang) 基後,PBS清洗一遍後加入1ml胰酶,細胞變圓脫落後,加入1ml含血清的培養(yang) 基終止消化,可使用血球計數板計數;
4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞,根據細胞數量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為(wei) 5%,細胞密度不低於(yu) 1x10(6)/ml,每支凍存管凍存1ml細胞懸液,注意凍存管做好標識;
將凍存管置於(yu) 程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(ge) 小時以後轉入液氮灌儲(chu) 存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
細胞用途
僅(jin) 供科研使用。
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