貨源介紹
細胞名稱:WB-F344(大鼠肝上皮樣幹細胞)
種屬:大鼠
生長特性:貼壁
細胞形態:上皮細胞樣
生長培養基DMEM高糖+10% FBS+1% P/S
培養條件氣相:空氣,95%;CO2,5%溫度:37℃
WB-F344大鼠肝幹細胞收到後處理:
細胞在培養瓶中培養至良好狀態後灌滿完全培養液並封好瓶口是細胞運輸的最好辦法。收到細胞回到自己的實驗室後,先打開外包裝,用75%酒精噴灑整個瓶消毒後放到超淨台內,嚴格無菌操作,培養箱靜置2-4小時。鏡下觀察:未超過80%匯合度時,可將瓶裝的完全培養液收集至離心管中,加入6ml完全培養基,放入37℃、5%CO2孵箱培養;超過80%匯合度時,根據情況傳代或者凍存,具體操作見細胞培養步驟。(注意發貨的是密封培養瓶的話,放入培養箱培養記得培養瓶蓋子擰鬆)
WB-F344大鼠肝幹細胞培養步驟:
1)複蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鍾,棄去上清液,補加4-6mL完全培養基後吹勻。然後將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入6cm皿中),培養過夜。第二天換液並檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
1、對於貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)於培養瓶中,置於37℃培養箱中消化1-2min,然後在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓並脫落,迅速拿回操作台,輕敲幾下培養瓶後加5ml以上含10%血清的完全培養基終止消化。
3.輕輕吹打細胞,完全脫落後吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鍾,棄去上清液,補加1-2mL培養液後吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補加培養液,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含5-6 ml培養液的新皿中或者瓶中。
2、對於懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心8-10分鍾,棄上清液,補加1-2ml培養液後吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或瓶中。
方法三:可選擇半數換液方式,棄半數培養基後,將剩餘細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基新皿中或者瓶中。
1)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。棄培養基後加入少量胰酶,細胞變圓脫落後,進行離心收集,1000RPM條件下離心8-10分鍾,去除上清,按凍存數量加入到凍存液中。
WB-F344大鼠肝幹細胞售後具體條款可以參考我司官網細胞網頁。
1. 細胞運輸途中遭遇的各種問題,細胞丟失、瓶身破損、培養液嚴重漏液等,重發;
2. 細胞汙染問題,請在收到產品48小時內,給我們提出真實的實驗結果,核實後重發;
3. 常溫發貨的細胞靜置24小時後,幹冰凍存發貨的細胞複蘇後24小時後,絕大多數細胞未存活,(需提供真實清晰的細胞狀態照片),重發;
4. 幹冰凍存發貨的細胞複蘇後24小時後或常溫發貨的細胞靜置4小時候並且未開封,出現汙染,重發;
5. 細胞活性問題,請在收到產品7天內給我們提出真實的實驗結果,用台盼藍染色法鑒定細胞活力,核實後予重發;
6. 細胞收到當天以及第2,3天請拍照,3天未告知的,視為產品合格。4-7天內出現問題有提供收到細胞前3天照片和細胞出現問題時照片以及細胞相關操作的詳細步驟的,並跟技術人員溝通的,由技術人員判定為我方責任的,重發。技術人員判定為雙方承擔責任的由雙方進行協商處理或者按合同價的50%收費重發。
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