貨源介紹

---

　　

　　產品類別：人源細胞係

　　生長特性：貼壁生長

　　培養體係：DMEM（高糖）+10%FBS

　　傳代方法：1：2傳代

　　細胞形態：上皮細胞樣

　　凍存條件：無血清細胞凍存液

　　保存條件：95％（ViabilitybyTrypanBlueExclusion）

　　傳代方法1:2傳代

　　傳代情況2~3天換液

　　培養體係溫度：37℃；氣相：空氣，95%；CO2，5%

　　細胞描述本庫的細胞僅用於科研工作，未經許可不得用於其他目的，使用者不得將本庫細胞轉讓給第三者。

　　凍存條件完全培養基50%+40%FBS+10%DMSO，液氮

　　細胞收到後處理：

　　細胞在培養瓶中培養至良好狀態後灌滿完全培養液並封好瓶口是細胞運輸的最好辦法。收到細胞回到自己的實驗室後，先打開外包裝，用75%酒精噴灑整個瓶消毒後放到超淨台內，嚴格無菌操作，培養箱靜置2-4小時。鏡下觀察：未超過80%匯合度時，可將瓶裝的完全培養液收集至離心管中，加入6ml完全培養基，放入37℃、5%CO2孵箱培養；超過80%匯合度時，根據情況傳代或者凍存，具體操作見細胞培養步驟。（注意發貨的是密封培養瓶的話，放入培養箱培養記得培養瓶蓋子擰鬆）

　　細胞培養步驟：

　　1）複蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鍾，棄去上清液，補加4-6mL完全培養基後吹勻。然後將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入6cm皿中），培養過夜。第二天換液並檢查細胞密度。

　　2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。

　　1、對於懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

　　方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心8-10分鍾，棄上清液，補加1-2ml培養液後吹勻，將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或瓶中。

　　方法三：可選擇半數換液方式，棄半數培養基後，將剩餘細胞懸起，將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基新皿中或者瓶中。

　　1）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。棄培養基後加入少量胰酶，細胞變圓脫落後，進行離心收集，1000RPM條件下離心8-10分鍾，去除上清，按凍存數量加入血清及DMSO，凍存比例為90%FBS+10%DMSO

　　PS：若客戶收到2ml小管細胞，收到細胞後，用75%酒精噴灑整個管子消毒後放到超淨台或安全櫃內，嚴格無菌操作；將小管細胞轉移至T25培養瓶或6cm培養皿，加入5ml左右完全培養基混勻，放入培養箱過夜培養後查看細胞密度：若密度未超過80%，換液繼續培養，視情況傳代或者凍存。若密度超過80%，可直接進行傳代（方法同上）。

　　主要致力於質粒微生物資源的保護、共享和持續利用，圍繞我國生命科學研究、生物技術創新和產業發展等重大需求，探索、發現、收集國內外的微生物資源，妥善長期保存管理；在保證生物安全和保護知識產權的前提下，為工農業生產、衛生健康、環境保護、科研教育提供質粒載體物物種資源、基因資源、信息資源和專業技術服務。旗下質粒載體網是一款提供質粒載體展示及定製的專業型網站，由智立中特（武漢）生物科技有限公司聯合多家企業公司科研院校共同打造！主要展示了各種基因類型下的質粒載體！